שקופיות מיקרוסקופ משמשות לבדיקת אורגניזמים חד תאיים ולהסתכלות מקרוב על צמחים ואורגניזמים קטנים. ישנם שני סוגים של מגלשות מוכנות: תושבות יבשות ותושבות רטובות. כל סוג של שיטת הכנה משמש להרכבת סוגים שונים של תאים. אם אתה רטוב ומרכיב דגימה חיוורת או שקופה במיוחד, ייתכן שיהיה עליך להכתים את הדגימה כך שתראה מתחת למיקרוסקופ.
צעדים
שיטה 1 מתוך 3: הכנת הר יבש
שלב 1. בחר שקופית נקייה
החזק את השקופית עד מקור אור והסתכל כדי לוודא שהיא נקייה מכתמים ולכלוך. רוב שקופיות המיקרוסקופ שטוחות מלמעלה ולמטה וצורתן מלבנית. הם ברורים, ומאפשרים לאור מהמיקרוסקופ לעבור ולהאיר את הדגימה השקופה שקופה. אם השקופית שלך מלוכלכת או כתומה, לא תוכל לבחון ביעילות את הדגימה שלך.
אם אתה מגלה שבשקופית המיקרוסקופ שלך יש זיהום כלשהו-כולל טביעות האצבע שלך-הקפידי על שטיפה מהירה עם סבון ומים נוזליים. יבש את השקופית באמצעות מטלית נקייה. אין להשתמש במגבונים או במגבות נייר, שכן אלה יכולים להשאיר מוך מאחור
שלב 2. בדוק את הדגימה כדי לקבוע אם יש לחתוך אותו
דגימת הדגימה צריכה להיות שקופה (או שקופה למחצה) לשקופה על מנת שהאור יעבור דרכו. אם האור אינו יכול לעבור במלואו דרך הדגימה ואל תוך עינית המיקרוסקופ, לא תוכל לראות את הדגימה דרך המיקרוסקופ.
חלק מהדגימות (למשל, קווצת שיער או כנף חרקים) דקות ודקיקות מעצמן, ולא יהיה צורך לחתוך אותן בעזרת סכין גילוח
שלב 3. פורסים חתיכה דקה מדגימת הדגימה
השתמש בסכין גילוח כדי לחתוך את חומר הדגימה שלך לפרוסה דקה ושקופה. תושבות יבשות הן הפשוטות ביותר להכנה מכיוון שהן אינן משתמשות בנוזל בין השקופית לדגימה. הר יבש אידיאלי לבדיקת דגימות שאינן בסיכון להתייבשות. חומרים שבדרך כלל מותקנים ביובש כוללים:
- פקק או עץ בלסה.
- עלי כותרת או עלים.
- רגליים או כנפיים חרקים.
- שיער, פרווה או נוצות.
שלב 4. מניחים את הדגימה לדוגמא בשקופית
השתמש בזוג מלקחיים כדי לאסוף את הפרוסה הדקה של הדגימה שלך. הניחו אותו בעדינות בצד אחד של השקופית. אם אתה משתמש בשקופית קעורה (שבה צד אחד יורד כלפי מטה), הנח את הדגימה במרכז האזור הקעור.
- הרכיבו את הדגימה בשקופית קעורה אם אתם חוששים שהדגימה תתגלגל או תגלוש מהשקופית השטוחה. לדוגמה, השתמש בשקופית קעורה אם אתה מכין כותרת פרח מסולסלת המתגלגלת לצד זה או אחר.
- עבור כל סוגי הדגימות האחרות, שקופית שטוחה תעבוד מצוין.
שלב 5. הגדר תלוש כיסוי על דגימת המדגם
תלוש המכסה מונע מדגימת הדגימה לצנוח מהשקופית. ההחלקה תגן גם על הדגימה במקרה שאחד ממשתמשי המיקרוסקופ יוריד את העדשה בטעות עד כדי כך שהיא מקישה על הדגימה.
- תלושי כיסוי הם חתיכות זכוכית דקיקות ושקופות או, בדרך כלל יותר, פלסטיק. כל תלוש הוא בערך 3⁄4 אינץ '(1.9 ס"מ) הן ברוחב והן באורך.
- השקופית המוכנה שלך מוכנה כעת להיבדק מתחת למיקרוסקופ.
שיטה 2 מתוך 3: הכנת הר רטוב
שלב 1. הניחו טיפה אחת של מים על השקופית
השתמשו בטפטפת כדי להפיל טיפה אחת של מים על המרכז המדויק של מגלשה שטוחה או קעורה. טיפת מים זו היא זו שנותנת להר הרטוב את שמו. הנוזל שומר על דגימת הלחות לחה ומונע מדגימות דגימות רטובות, אורגניות להתייבש ולעוות את צורתן. המים גם משמרים דגימות חיות, כגון אורגניזמים חד תאיים.
אם אתה רוצה לעשות שקופית קבועה באמצעות חומר אורגני מת, אתה יכול להשתמש בשכבה דקה של לק שקוף במקום בטיפת מים
שלב 2. לגרד או לפרוס קטע מדגימת דגימה רטובה
דוגמאות לדוגמא המשמשות לתליחות רטובות הן בדרך כלל חומר אורגני רטוב או חי. השתמש בסכין גילוח או בקיסם כדי לחתוך או לגרד כמות קטנה מהדגימה הרטובה שלך. החומרים המשמשים בדרך כלל להכנת שקופיות הרטובות כוללים:
- תאי לחיים או רובד שיניים (מגורדים מהפה בעזרת קיסם).
- חתך דק של גבעול צמחי (חתוך בעזרת סכין גילוח).
- אם אתה לומד אורגניזמים חד תאיים, למשל, אמבה או פינצטה פרמציום לא יועיל במיוחד. במקום זאת, השתמשו בטפטפת נקייה כדי להרים כמה טיפות מהמים שבהם שוחים האורגניזמים החד-תאיים או האצות.
שלב 3. הנח את דגימת הדגימה שלך בטיפת המים שלך
בהתאם לסוג החומר שבו אתה משתמש כדגימת הדגימה שלך, השתמש בזוג מלקחיים, פינצטה או קיסם כדי להעביר את הדגימה לשקופית. הנח את הדגימה במרכז טיפת המים שלך, כך שהיא תלויה בנוזל.
אם אתה משתמש בטפטפת כדי לאסוף אורגניזמים חד תאיים, הנח 1 או 2 טיפות לתוך טיפת המים שכבר נמצאת בשקופית
שלב 4. הגדר תלוש כיסוי על גבי הדגימה הרטובה
החזק את תלוש המכסה בזווית של 45 °. הניחו את אחד הקצוות כלפי מטה ממש ליד הדגימה על טיפת המים. לאחר מכן הורד את הצד השני של השקופית עד שהוא שטוח על גבי הדגימה. אתה אמור לראות את טיפות המים המתפשטות מתחת להחלקה המכסה עד שהן מגיעות לקצותיה.
אין להקיש או ללחוץ על כריכת המכסה ברגע שהיא במקומה. אם תעשה זאת, אתה מסתכן בסירוק הדגימה והמים מהשקופית
שיטה 3 מתוך 3: מכתים דגימות סלולריות
שלב 1. הניחו דף מגבת נייר על קצה אחד של תלוש המכסה
הניחו את המגבת על קצה החלקה מבלי להפריע לחומר מתחת למעטה המכסה. מגבת הנייר הסופחת תוציא חלק מהמים החוצה מתחת לפרוסת המכסה, ותמשוך את חומר ההכתמה מתחת לתלוש המכסה אל הדגימה.
- אם דגימת השקופית הרטובה שלך חיוורת או חסרת צבע (למשל חתך של גזע צמח חסר צבע), יתכן שיהיה קשה לראות אותה כאשר אתה מסתכל דרך מיקרוסקופ. צביעת הדגימה תאפשר לך לראות טוב יותר את צורתו ומרקמו.
- זה נעשה בדרך כלל לאחר שכבר בדקת את הדגימה הרטובה בשקופית מבלי להכתים אותה. השקופית עשויה להיות מוכנה כבר, גם אם היא אינה מוכתמת.
שלב 2. מניחים בצד השני של תלוש המכסה טיפה אחת של יוד או מתילן כחול
השתמש בטפטפת עיניים ושחרר את הכימיקל המכתים על גבי שקופית המיקרוסקופ, ממש ליד תלוש המכסה. היזהר לתת רק טיפה אחת. עודף חומר מכתים עלול לברוח מהמגלשה.
- יוד או כחול מתילן ניתן לרכוש בכל חנות חינוך או חנות ציוד לביולוגיה.
- דרך חלופית לעשות זאת היא להוסיף את טיפת חומר הצביעה למים בשקופית רטובה כאשר מכינים אותה לראשונה. במקרה זה, אינך צריך מגבת נייר.
שלב 3. המתן בזמן שסוכן הצביעה נמשך מתחת לכריכת השקופית
חומר הצביעה יתחיל לחלחל מתחת לפרוסת המכסה כאשר מגבת הנייר שואבת מים מהצד השני. ייתכן שיחלפו עד 5 דקות עד שהיוד או הכחול מתילן ייספרו לגמרי מתחת לכריכה של השקופית ורוויחו את הדגימה.
לאחר שהיוד או כחול המתילן משכו כל הדרך מתחת לכריכת השקופית, הדגימה צבועה במלואה
שלב 4. נגב את חומר הצביעה העודף בעזרת מגבת נייר נקייה
נקו את פני השקופית כך שלא יישפכו נוזלים רופפים מהצד. השקופית הרטובה שלך מוכתמת ומוכנה לצפייה מתחת למיקרוסקופ.
